• 
    
    
    
  • 
    
  • av天堂免费在线观看_人人妻人人超_人人妻人人做人人爽_最新精品国偷自产在线69_来一水AV@lysav

    產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

    首頁 > 技術(shù)與支持 > 講解質(zhì)粒抽提步驟
    講解質(zhì)粒抽提步驟
    點(diǎn)擊次數(shù):2521 更新時(shí)間:2021-09-02

    質(zhì)粒抽提(Plasmid Extraction)方法即去除 RNA,將質(zhì)粒與細(xì)菌基因組 DNA分開,去除蛋白質(zhì)及其它雜質(zhì),以得到相對(duì)純凈的質(zhì)粒。提取質(zhì)粒DNA的方法有很多種,從提取產(chǎn)量上分可分為微量提取、中量提取、大量提取,從使用儀器上分可分為一般提取和試劑盒方法提取,從具體操作方法分可以分為堿裂解法、煮沸法、牙簽法等,各種不同的方法各有其優(yōu)缺點(diǎn),根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康目梢圆捎煤线m的提取方法。

    3.png

    Ⅰ.使用質(zhì)粒提取試劑盒提取質(zhì)粒時(shí)請(qǐng)參考具體試劑盒的操作說明。如Omega公司的E.Z.N.A.® Plasmid Mini Kit I, Q(capless) Spin (質(zhì)粒提取盒)。


    Ⅱ.堿裂解手提法:此方法適用于小量質(zhì)粒DNA的提取,提取的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切、PCR擴(kuò)增、銀染序列分析。方法如下:

    1、接1%含質(zhì)粒的大腸桿菌細(xì)胞于2mlLB培養(yǎng)基。

    2、37℃振蕩培養(yǎng)過夜。

    3、取1.5ml菌體于Ep管(離心管),以4000rpm離心3min,棄上清液。

    4、加0.lml溶液I(1%葡萄糖,50mM/LEDTApH8.0,25mM/LTris-HClpH8.0)充分混合。

    5、加入0.2ml溶液II(0.2mM/LNaOH,1%SDS),輕輕翻轉(zhuǎn)混勻,置于冰浴5min.

    6、加入0.15m1預(yù)冷溶液III(5mol/LKAc,pH4.8),輕輕翻轉(zhuǎn)混勻,置于冰浴5min.

    7、以10,000rpm離心20min,取上清液于另一新Ep管

    8、加入等體積的異丙醇,混勻后靜置10min.

    9、以10,000rpm離心20min,棄上清。

    10、用70%乙醇0.5ml洗滌一次,抽干所有液體。

    11、待沉淀干燥后,溶于50ulTE緩沖液中(或60℃溫育去離子水)



    av天堂免费在线观看_人人妻人人超_人人妻人人做人人爽_最新精品国偷自产在线69_来一水AV@lysav
  • 
    
    
    
  • 
    
  • 横山县| 文水县| 扬州市| 池州市| 蒙山县| 天津市| 海阳市| 鸡泽县| 福建省| 土默特左旗| 肥西县| 汉沽区| 石首市| 喀喇沁旗| 库尔勒市| 吉首市| 麻阳| 延津县| 桃园市| 怀化市| 禄丰县| 阳曲县| 渑池县| 伊春市| 麟游县| 江北区| 贞丰县| 昆明市| 宁南县| 广丰县| 九江县| 墨竹工卡县| 隆回县| 安塞县| 墨竹工卡县| 张家界市| 祥云县| 济阳县| 宁晋县| 兴安县| 锡林浩特市|