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    米曲霉通用型染料法熒光定量PCR試劑盒說明書

    點擊次數(shù):631 發(fā)布時間:2021/10/7
    提 供 商: 上海撫生實業(yè)有限公司 資料大小:
    圖片類型: 下載次數(shù): 105
    資料類型: DOC 瀏覽次數(shù): 631
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    1、試劑盒簡介貨為了適應米曲霉通用型染料法熒光定量PCR試劑盒快速檢測和疫病研究的需要,本公司參照 OIE 國際標準中規(guī)定的引物序列,經(jīng)多次實驗及系統(tǒng)優(yōu)化,開發(fā)了本試劑盒。應用本試劑盒進行檢測具有快速、靈敏、特異、準確、安全操作簡單、應用廣泛和高通量檢測等特點及優(yōu)點。2、試劑盒組成:

    試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴增試劑,具體組成參見表 1:s

    表 1:試劑盒組成(50test/盒)

     

    大560.png

    試劑盒組成及試劑配制:

    1.  酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
    2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
    3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
    4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
    5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
    6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
    7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
    8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
    9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
    10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

    樣本處理及要求:
    1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
    2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
    3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
    4.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

    操作流程:

    1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

    3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

    4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

    6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

    樣本:血清 血漿 組織勻漿等液體樣本

    標記物:血清 血漿 組織勻漿等

    應用:僅用科研實驗檢測定量,定性檢

    檢測方法:夾心法

    技術要求:全程按說明書步驟檢測,操作規(guī)范,專業(yè),儀器設備齊全。

    規(guī)格:48t/96t 

    性狀:液體 

    運輸方式:快遞發(fā)貨 

    有效期:6個月品

    特點:靈敏性高,---性,吸附均勻,吸附性好,回收利用率高,是一款可以讓您放心選購的產(chǎn)品。

    使用范圍:此產(chǎn)品供科研實驗使用,不得用于---。

    用途:用于測定人血清、血漿、組織及相關液體樣本中的含量或活性。

    注意事項:

    1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

    2.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

    3.請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

    4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    5.底物請避光保存。

    6.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

    7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

    8.本試劑不同批號組分不得混用。

    9.不能使用過期產(chǎn)品。

    10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。 

    每個樣品測試反應體系配制見下表 2。

    表 2 每個樣品測試反應體系配制表

     

    小360.png

    注:本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。

     

     

     


     
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